| i）操作法 |
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| 試料1) 1 ml（g） |
| ↓ |
i）0.01 N HCl 4 mlを加えて混和あるいはホモジナイズする．
ii）酢酸エチル 5 mlおよび炭酸アンモニウム（Ammonium carbonate）粉末 1.5 gを加える．
iii）１０分間振盪後，3,000 rpmで１０分間遠心する． |
| 酢酸エチル層 |
| ↓ |
i）0.1 N HCl 2.0 mlを加える．
ii）１０分間．振盪後，3,000 rpmで１０分間遠心する． |
| 塩酸層 1.8 ml |
| ↓ |
i）酢酸エチル 0.8 mlおよび 0.2 N NaOH液 1.0 mlを加える．
ii）１０分間振盪後，3,000 rpmで１０分間遠心する． |
| 残渣 |
| ↓ |
酢酸エチル 20 μlに溶かし，その 1 μlを注入する． |
| GC-NPDあるいはGC/MS |
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| 【注 解】 |
| １） |
試料は血清，血液，尿，胃内容物あるいは組織．試料量により，抽出操作スケールの変更可能． |
| ２） |
本抽出法は塩基性薬毒物の定量分析に適用できる．その際の内部標準物質には，分析対象物質の類縁化合物あるいは重水素標識体を用いる． |
| ３） |
0.1 N 塩酸による逆抽出および酢酸エチルによる再抽出の際，水層のpHが正しく酸性あるいはアルカリ性になっていることをpH試験紙で確認する． |
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| ii）GC-NPDおよびGC/MSの操作法および条件 |
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GC-NPDおよびGC/MSの操作法は各機器の取り扱い説明書を参照． |
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GC-NPDおよびGC/MSの条件は中・酸性および塩基性薬毒物（固相抽出）と同じ．ただし，ハロペリドール，トリアゾラムのように治療レベルが低く，かつ保持時間が長い化合物が想定されるときには，以下の条件で行う． |
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| GC-NPD の条件 |
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| 装置： |
ガスクロマトグラフ |
| 検出器： |
NPD（FTD）（窒素-リン検出器） |
| カラム： |
DB-5ms，10 m×0.25 mm i.d.，膜厚 0.25 μm |
| カラム温度： |
カラム 150℃（1 min，スプリットレス）-（30℃/min）-300℃（9 min）；
注入部 290℃，検出器 300℃ |
| キャリアガス： |
ヘリウム 1.0 ml/min |
| メイクアップガス： |
40 ml/min |
| 測定時間： |
12 min |
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| GC/MS の条件 |
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| 装置： |
ガスクロマトグラフ/質量分析計 |
| カラム： |
DB-5ms，10 m×0.25 mm i.d.，膜厚 0.25 μm |
| カラム温度： |
カラム 150℃（0.5 min，スプリットレス）-（30℃/min）-300℃（9 min）；
注入部 290℃，インターフェース・イオン源 260℃ |
| キャリアガス： |
ヘリウム 1.0 ml/min |
| イオン化： |
EI（電子衝撃），70 eV |
| 測定時間： |
質量範囲 m/z 50-650；時間 12 min |
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| iii）コメント |
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本法は逆抽出および再抽出操作を含むので十分クリーンな抽出物が得られ，回収率もほぼ満足できるが，主として化合物の pKa 値の違いに起因する回収率の変動は避け得ない．本法では抽出に炭酸アンモニウム（Ammonium
carbonate）， 0.1 N HCl，0.2 N NaOH液および酢酸エチルを用いているが，これらは他の試薬，緩衝液および溶媒に変更できる．
スクリーニングおよび確認については中・酸性および塩基性薬毒物（固相抽出）のコメント参照． |
