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| B−2.馬尿酸 |
| (2)高速液体クロマトグラフィー(HPLC) |
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| i)操作法 |
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| 試料1) (尿) 0.5 ml |
| ↓ |
遠心分離(12,000 rpm で 10 分間) |
| 上清 |
| ↓ |
5 μl を注入する. |
| HPLC |
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| 【注 解】 |
| 1) |
正常人尿では試料を希釈しなくても測定可能であるが,濃度によって適宜水で希釈して再度測定. |
| 2) |
トルエン曝露の判定は呈色法の注解2)を参照. |
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| ii)HPLCの条件 |
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| 装置: |
高速液体クロマトグラフ |
| 検出器: |
紫外検出器 |
| カラム: |
Candenza CD-C18 (Imtakt) 1)
15 cm×4.6 mm i.d.,粒径 5 μm |
| カラム温度: |
室温 |
| 移動相: |
アセトニトリル/0.1 % TFA(15:85,v/v)2) |
| 流速: |
0.7 ml/min |
| 測定: |
波長 250 nm 3) ;時間 20 min 4) |
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| 【注 解】 |
| 1) |
カラムは通常の ODS カラムあるいはC 8 (オクチル基)カラムでも使用可能である. |
| 2) |
移動相にメタノールを使用すると理論段数が悪くなる場合がある. |
| 3) |
測定波長が 225 nm 付近では夾雑ピークの影響を受けやすい.夾雑物の影響を受ける場合は測定波長を適宜変更する. |
| 4) |
馬尿酸の保持時間は 8.9 min である. |
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