| i）前処理 |
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| 試料1) |
| ↓ |
i) 1.0% ライネッケ塩液2)1 mlを加える．
ii) 室温に１時間静置後，遠心分離（1,200 g）する． |
| 沈渣3) |
| ↓ |
i) 0.3N HCl 2 mlを加え，水浴上で加温して溶解する．．
ii) 0.2M 塩化ニッケル（II）液4) 1 mlおよびトルエン0.5 mlを加える．
iii) 15℃で，2.6M 水素化ホウ素ナトリウム液5) 1 mlを加え，室温で１時間静置する． |
| 反応液 |
| ↓ |
ジエチルエーテル各2 mlで4回抽出する． |
| 有機層 |
| ↓ |
無水K2CO3を加え，脱水する． |
| 乾燥有機層 |
| ↓ |
トリフルオロ酢酸を数滴加えた後，溶媒を減圧下留去する． |
| 残渣 |
| ↓ |
i) 内部標準液6)50 μlに溶解する．
ii) 微量の水を加えて混和後，無水K2CO3を少量加え，脱水する． |
| 酢酸エチル層 |
| ↓ |
1 μlを注入する． |
| GC |
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| 【注 解】 |
| １） |
試料は体液，体組織．血液（1 mlまたはg）に10％トリクロロ酢酸液1.5 mlを加え除蛋白する．除蛋白液を3,000 rpm，10分間遠心分離後，上清を分取する．沈殿部分は10％トリクロロ酢酸液
各1 mlで2回洗浄する (撹拌・遠心・分取)．上清液と洗浄液を合わす．尿（1 ml）はそのまま使用する (必要があれば遠沈する)． |
| ２） |
ライネッケ塩一水和物｛Reinecke salt monohydrate: NH4[Cr(NCS)4(NH3)2]H2O｝1 gを水に溶かし100 mlにする． |
| ３） |
沈渣を1.0 %ライネッケ塩液1 mlで洗浄する． |
| ４） |
塩化ニッケル（II）六水和物4.75 gを水に溶かし100 mlにする． |
| ５） |
水素化ホウ素ナトリウム（sodium borohydride: NaBH4）9.86 gを水に溶かし100 mlにする． |
| ６） |
内部標準液はキサンテン（xanthene）4 mgを酢酸エチルに溶かし100 mlにする． |
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| ii）GCの条件 |
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装置：
検出器：
カラム：
温度：
キャリアガス： |
ガスクロマトグラフ
ＦＩＤ（水素炎イオン化検出器）
5% KOH＋5% Apiezon L/Chromosorb W
（AW DMCS，60～80 mesh）1)，2 m×3 mm i.d.
カラム 250℃ ； 注入口・検出器 250℃
窒素 30 ml/min 測定時間：18 min |
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| 【注 解】 |
| １） |
カラムは同等品で代替できる． |
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| 表３．パラコートおよびジクワットの還元誘導体の保持時間 |
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| 化 合 物 |
保持時間（分） |
定量範囲*（μg/ml） |
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| Paraquat還元体 |
4.4 |
1-70 |
| Diquat還元体 |
4.8，6.3 |
1-70 |
| Xanthene |
8.5 |
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*パラコートジクロライド，ジクワットジブロマイドとして |
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| 【文 献】 |
| １． |
Kawase S et al. J Chromatogr 1984；283：231-240． |
