| i）前処理 |
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| 試 料1) |
| ↓ |
i) 2N NaOH液でpHを約11に調整する2)．
ii) カートリッジにアプライする． |
| Sep-Pak C18 カートリッジ3),4)（オリジナル，Waters） |
| ↓ |
i) 水3 ml，メタノール3 ml，水5 mlで順次カートリッジを洗浄する．
ii) 0.1N HCl4 mlで溶出する． |
| 溶出液 |
| ↓ |
i) 水を加えて全量を正確に5.0 mlにする．
ii) 発色試薬5) 0.5 mlを加える． |
| 呈色液6) |
| ↓ |
セルに入れる． |
| 分光光度計7-10) |
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| 【注 解】 |
| １） |
試料は体液，体組織．体液（1 mlまたはg）はVortexミキサーで撹拌しながら10％トリクロロ酢酸液1 mlを加え除蛋白する．臓器・組織（1
g）は10％トリクロロ酢酸液5 mlを加えてホモジナイズする．除蛋白液を3,000 rpm，10分間遠心分離後，上清を分取する．沈殿部分は10％トリクロロ酢酸液
各1 mlで2回洗浄する (撹拌・遠心・分取)．上清液と洗浄液を合わす． |
| ２） |
アルカリ性にした後，直ちにSep-Pak C18カートリッジに注入する．パラコート，ジクワットはアルカリ性で分解する．特にジクワットは著しい． |
| ３） |
Sep-Pak C18カートリッジに流すときの流速は5 ml/min以下で行い，カートリッジに空気が入らないように注意する．空気が入ると回収率が低下する． |
| ４） |
Sep-Pak C18カートリッジは各5 mlの水，メタノール，0.1 N HCl，水を順次流し充填剤を予め活性化しておく． |
| ５） |
発色試薬：1 %ハイドロサルファイトナトリウム/1 N NaOH溶液．発色試薬は用時調整し，２時間以内に使用する． |
| ６） |
呈色はやや不安定で退色する傾向があるため，発色後すみやかに測定する． |
| ７） |
水5 mlに発色試薬0.5 mlを加えた液を対照として用いる． |
| ８） |
得られた吸光度を次式により補正する．
パラコートの吸光度補正式：Ep = E600 - (E550 + E650) / 2
E550，E600，E650：550，600，650nmにおける吸光度実測値
ジクワットの吸光度補正式：Ed = E430 - 0.3 x Ep
E430：430 nmにおける吸光度実測値
検量線よりパラコートおよびジクワットのイオン量（μg）を求める． |
| ９） |
検量線はパラコートおよびジクワット標準液を適宜希釈して得た所定濃度液5 mlに発色試薬0.5 mlを加えて発色させ，補正値より検量線を作成する． |
| １０） |
検出限界はパラコートで約0.5 μg/ml，ジクワットで約3 μg/mlである． |
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| 【文 献】 |
| １． |
福家 他．中毒研究 1992；5：387-393． |
| ２． |
パラコート含有除草剤−中毒症状と処置法−，ＰＱ協議会，1995． |
