| i）前処理 |
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| 試料1) 0.1 ml |
| ↓ |
i) 水0.4 mlを加え、混和する．
ii) 1-クロロブタン2) 2 mlを加え，15分間撹拌後，遠心分離（2,000 rpmで5分間）する．
iii) 有機溶媒層（下層）を分取する．
iV) 上記 ii)および iii)の操作を再度行う（2回抽出）． |
| 有機溶媒層（抽出液を合わせる） |
| ↓ |
水浴上，窒素ガス気流で溶媒を留去する3)． |
| 残渣 |
| ↓ |
移動相100 μlを加えて溶解し4)，その20 μlを注入する． |
| HPLC |
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| 【注 解】 |
| １） |
試料は血液，血清，尿など． |
| ２） |
1-クロロブタンによる回収率はmethomyl 75%，その他は80% 以上である．methomyl以外のカルバメート系農薬はヘキサンで抽出できる． |
| ３） |
完全に乾固すると，1-naphthol (carbarylの分解物) 以外の分解物は揮散する． |
| ４） |
移動相に溶解し，長時間室温に放置すると分解する．低温（4℃）に保てば，分解はかなり防げる． |
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| ii）HPLCの条件 |
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装置：
検出器：
カラム：
カラム温度：
移動相：
流速：
測定： |
高速液体クロマトグラフ
紫外可視検出器
Nova-Pak C181)，15 cm×3.9 mm i.d.，粒径4 μm
室温
アセトニトリル/水2)
1 ml/min
波長 210 nm ； 時間 30 min |
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| 【注 解】 |
| １） |
カラムはZorbax ODS，Hypersil ODSなどのODS (オクタデシルシラン系シリカゲル) 同等品で代替できるが，保持時間は異なる． |
| ２） |
アセトニトリル/水の溶媒比は下表参照． |
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| 表１．カルバメート系農薬とその分解物の保持時間 |
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| 化 合 物 |
保持時間（分） |
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| CH3CN:H2O(v/v) |
| 6:94 |
30:70 |
40:60 |
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| Methomyl |
8.8 |
1.8 |
1.5 |
| Metocarb(MTMC) |
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5.1 |
2.9 |
| Propoxur(PHC) |
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6.5 |
3.4 |
| Xylycarb(MPMC) |
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8.3 |
3.9 |
| Carbaryl(NAC) |
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8.9 |
4.0 |
| XMC |
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9.1 |
4.2 |
| Isoprocarb(MIPC) |
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12.6 |
5.3 |
| Fenobucarb(BPMC) |
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23.6 |
8.2 |
| Methomyl 分解物 |
3.7 |
1.6 |
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| 2-Cresol(MTMC 分解物) |
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4.5 |
2.7 |
| 3,4-Xylenol(MPMC 分解物) |
|
6.7 |
3.5 |
| 3,5-Xylenol(XMC 分解物) |
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7.5 |
3.8 |
| 2-Isopropoxyphenol(PHC 分解物) |
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9.4 |
4.7 |
| 1-Naphthol(NAC 分解物) |
|
11.6 |
4.9 |
| 2-Isopropylphenol(MIPC 分解物) |
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18.2 |
7.1 |
| 2-sec-Butylphenol(BPMC 分解物) |
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36.2 |
11.7 |
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| 【注 解】 |
| １） |
注入絶対量（20 µl）で2 ngは検出可能（試料中濃度0.1 µg/ml）． |
