i)前処理 |
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試料1) 0.1 ml |
↓ |
i) 水0.4 mlを加え、混和する.
ii) 1-クロロブタン2) 2 mlを加え,15分間撹拌後,遠心分離(2,000 rpmで5分間)する.
iii) 有機溶媒層(下層)を分取する.
iV) 上記 ii)および iii)の操作を再度行う(2回抽出). |
有機溶媒層(抽出液を合わせる) |
↓ |
水浴上,窒素ガス気流で溶媒を留去する3). |
残渣 |
↓ |
移動相100 μlを加えて溶解し4),その20 μlを注入する. |
HPLC |
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【注 解】 |
1) |
試料は血液,血清,尿など. |
2) |
1-クロロブタンによる回収率はmethomyl 75%,その他は80% 以上である.methomyl以外のカルバメート系農薬はヘキサンで抽出できる. |
3) |
完全に乾固すると,1-naphthol (carbarylの分解物) 以外の分解物は揮散する. |
4) |
移動相に溶解し,長時間室温に放置すると分解する.低温(4℃)に保てば,分解はかなり防げる. |
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ii)HPLCの条件 |
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装置:
検出器:
カラム:
カラム温度:
移動相:
流速:
測定: |
高速液体クロマトグラフ
紫外可視検出器
Nova-Pak C181),15 cm×3.9 mm i.d.,粒径4 μm
室温
アセトニトリル/水2)
1 ml/min
波長 210 nm ; 時間 30 min |
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【注 解】 |
1) |
カラムはZorbax ODS,Hypersil ODSなどのODS (オクタデシルシラン系シリカゲル) 同等品で代替できるが,保持時間は異なる. |
2) |
アセトニトリル/水の溶媒比は下表参照. |
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表1.カルバメート系農薬とその分解物の保持時間 |
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化 合 物 |
保持時間(分) |
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CH3CN:H2O(v/v) |
6:94 |
30:70 |
40:60 |
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Methomyl |
8.8 |
1.8 |
1.5 |
Metocarb(MTMC) |
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5.1 |
2.9 |
Propoxur(PHC) |
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6.5 |
3.4 |
Xylycarb(MPMC) |
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8.3 |
3.9 |
Carbaryl(NAC) |
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8.9 |
4.0 |
XMC |
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9.1 |
4.2 |
Isoprocarb(MIPC) |
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12.6 |
5.3 |
Fenobucarb(BPMC) |
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23.6 |
8.2 |
Methomyl 分解物 |
3.7 |
1.6 |
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2-Cresol(MTMC 分解物) |
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4.5 |
2.7 |
3,4-Xylenol(MPMC 分解物) |
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6.7 |
3.5 |
3,5-Xylenol(XMC 分解物) |
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7.5 |
3.8 |
2-Isopropoxyphenol(PHC 分解物) |
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9.4 |
4.7 |
1-Naphthol(NAC 分解物) |
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11.6 |
4.9 |
2-Isopropylphenol(MIPC 分解物) |
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18.2 |
7.1 |
2-sec-Butylphenol(BPMC 分解物) |
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36.2 |
11.7 |
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【注 解】 |
1) |
注入絶対量(20 µl)で2 ngは検出可能(試料中濃度0.1 µg/ml). |