| i）前処理（液-液抽出） |
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| 試料（血清，血漿，全血）1) 1 ml |
| ↓ |
i) 内部標準溶液2)（50 µg/ml） 0.1 mlと0.2M リン酸一水素二ナトリウム・0.1M クエン酸緩衝液(pH 3.0) 3) 1 mlを加える.
ii) 酢酸エチル3 mlを加えて10分間振盪抽出する．
iii) 3,000 rpmで5分間遠心する． |
| 酢酸エチル層 |
| ↓ |
無水硫酸ナトリウムで脱水後，窒素気流下(室温)，溶媒を留去する. |
| 残渣 |
| ↓ |
移動相100 µlに再溶解し，5 µlを注入する． |
| HPLC |
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| 【注 解】 |
| １） |
尿中代謝物(グルクロン酸抱合体・硫酸抱合体)の分析については，ß-グルクロニダーゼ-スルファターゼ処理後に抽出する方法がある. |
| ２） |
内部標準物質としては、pranoprofenなどのプロピオン酸系解熱鎮痛薬を使用する． |
| ３） |
Ａ液：0.1 Mクエン酸溶液（クエン酸一水和塩・C6H8O7 H2O）21.0 gを水1,000 mlに溶解，
Ｂ液：0.2 Mリン酸一水素二ナトリウム溶液（リン酸一水素二ナトリウム二水和塩・Na2HPO4 2H2O）35.61 gを水1,000 mlに溶解．Ａ液79.45 mlとＢ液20.55 mlを混合し, pH 3.0に調整する. |
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| ii）HPLCの条件 |
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装置：
検出器：
カラム：
カラム温度：
移動相：
流速：
測定： |
高速液体クロマトグラフ
紫外可視検出器
LiChlospher RP18(e), 25 cm X 4.6 mm i.d., 粒径10 µm
室温
メタノール/1N酢酸 (70:30, v/v) 1)
0.4 ml/min
波長254 nm ； 時間10 min |
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| 【注 解】 |
| １） |
解熱鎮痛薬（19種類）の一斉分析に用いられている．本条件下で，アセトアミノフェンの保持時間は5.7 minである．ODS系カラムを使用した分析には，他の移動相として，（１）50
mMリン酸アンモニウム(pH 5.8) /アセトニトリル(85:15, v/v)，（２）10 mMリン酸アンモニウム(pH 2.5)/アセトニトリル(4:1,
v/v)などがある． |
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| 【文 献】 |
| １． |
篠塚達雄 他．解熱鎮痛薬試験法．日本薬学会編．薬毒物試験法注解-分析・毒性・対処法-． 東京：東京化学同人; 2006. p.227-238. |
| ２． |
田中栄之介.アセトアミノフェン（パラセタモール）．鈴木修，屋敷幹雄 編．薬毒物分析実践ハンドブック-クロマトグラフィーを中心として-．東京：じほう；2001．p.280-286. |
