| i）前処理 |
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| 試料1)0.2 ml |
| ↓ |
下記混合液に加える． |
| 混合液2) |
| ↓ |
直ちに vortexで1分間撹拌する． |
| 反応液 |
| ↓ |
i) リン酸二水素カリウム 0.1 gを加える．
ii) 直ちに室温で10秒間撹拌後，2,500 rpmで15分間遠心分離する． |
| 有機溶媒層 |
| ↓ |
1 μlを注入する3)． |
| GC/MS |
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| 【注 解】 |
| １） |
試料は血液、尿など．冷凍保存しておくことが望ましい．硫化水素の揮散を防ぐため，冷試料を用いる． |
| ２） |
予め，5mM TDMBA (tetradecyldimethylbenzylammonium chloride)/oxygen-free ほう砂飽和水溶液4) 0.8 ml，1 µM（あるいは10 µM）1,3,5-tribromobenzene（IS）/酢酸エチル溶液 2 mlおよび20mM PFBBr
(pentafluorobenzyl bromide)/トルエン（あるいは酢酸エチル）溶液 0.5 mlを入れておく． |
| ３） |
GC-ECDの場合は，n-ヘキサンで10倍に希釈し，その1 μlを注入する． |
| ４） |
5mM相当のTDMBAおよび過剰量のほう砂を15分間窒素ガスでバブリングした蒸留水に溶かす． |
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| ii）GCの条件 |
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装置：
カラム：
温度：
キャリアーガス： |
ガスクロマトグラフ，電子捕獲検出器（ECD）付き
5% Apiezon grease L-Chromosorb W（AW-DMCS）,
（60-80 mesh）2.1 m×3 mm i.d.
カラム 200℃ ； 注入部・検出器 200℃
窒素 50 ml/min |
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| 【注 解】 |
| １） |
硫化水素のアルキル誘導体の保持時間は4.2分，検出限界は0.01 µg/g． |
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| iii）GC/MS条件 |
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装置：
カラム：
温度：
キャリアーガス：
： |
ガスクロマトグラフ/質量分析計
HP-5, 30 m×0.32 mm i.d.，膜厚 0.25 μm
カラム 100℃（2 min）-（10℃/min）-220℃； 注入部 230℃
セパレーター 240℃ ； イオン源 210℃
ヘリウム 2 ml/min
EI（電子衝撃）， 70 eV |
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| 【注 解】 |
| １） |
硫化水素の誘導体化により生成するbis (pentafluorobenzyl) sulfideのフラグメントイオンはm/z 394 (M+)，213，181
(base peak)などである．内部標純物質のフラグメントイオンはm/z 314 (M+ + 2, base peak)，235 (M+ +
2 – Br)などである． |
| ２） |
本法の検出限界は0.001 μmol/ml，定量範囲は0.002 – 0.1 μmol/ml（硫化物として）である． |
| ３） |
硫化水素は速やかにチオ硫酸塩に代謝されること，および死後産生されることから，その代謝物であるチオ硫酸塩の分析も行うことを奨める．一般に，チオ硫酸塩濃度は硫化物濃度より数倍から10倍高い． |
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| 【文 献】 |
| １． |
Kage, S. et al．J Forensic Sci 1998；43：908-910. |
