| i）操作法 |
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| １） |
5 mlの注射器2)（ＣＯ解離用）に採血針3)を刺入する（図Ａ）． |
| ２） |
血液（水で5倍希釈）あるいは体腔液約 1 gを注射筒に滴下し，重量を精秤する． |
| ３） |
ガラス球を1個4)，4%トリトンX-100（溶血剤）を3滴，n-オクタノール（消泡剤）3滴を加える． |
| ４） |
塩化リチウム飽和液を塗布したプランジャーを挿入し，空気を追い出す． |
| ５） |
注射器を逆にし（図Ｂ），注射針をＧＣ用セプタム取り付け位置まで抜いた後，プランジャーを押して完全に脱気する． |
| ６） |
ＧＣのキャリヤーガス排出口に接続したゴム管に注射針を刺入し，ヘリウム約1 mlを吸入後，採血針を抜き取り，注射器を5分間振盪5)． |
| ７） |
塩化リチウム飽和液で気密にし，ヘリウムで置換した1 mlの注射器6)に5 mlの注射器の気相を取り，ＧＣに注入する（腐敗によるメタンガスがないことを確認）7)． |
| ８） |
5 mlの注射器に再度採血針を取り付け，新たにヘリウムガス0.5 mlを吸入した後，採血針を抜き取り，マイクロシリンジで内部標準ガスとしてメタンガス20
μl8)を加える． |
| ９） |
20% フェリシアン化カリウム液（解離剤）0.3 ml9)を添加する． |
| １０） |
5分間振盪し，ヘリウムで置換した1 mlの注射器6)で気相を採取し，ＧＣに注入する． |
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| 【注 解】 |
| １） |
本法は図１のように，注射器内で血液にフェリシアン化カリウムを加えて反応させ，解離した CO を注射器で採取し，GC で分析する． |
| ２） |
予め注射針取付部にユニチューブで GC 用セプタムを取り付けておく． |
| ３） |
テルモ社のマルチプル採血針 MN-2238M, 22G x 11/2”(1.5”)（0.70 x 38 mm)． |
| ４） |
直径約 0.7 cm のガラス球を使用． |
| ５） |
イワキ KM-Shaker V-S 振盪盤などを使用． |
| ６） |
注射針を取り付け，GC 用セプタムから5 mlの注射筒に刺入する． |
| ７） |
腐敗した試料ではメタンが検出されるが，メタンの妨害がなくなるまでヘリウム洗浄を２～３回繰り返す． |
| ８） |
CO-Hb が 3%以下の時は 2 μl を加える．100 μl または10 μl のマイクロシリンジ を使用． |
| ９） |
0.5 ml のツベルクリン用注射器とマント針（ミサワ工業製）を使用． |
| １０） |
注射器は全てガラス製で，ディスポは不適．また，セプタムは10検体程度で交換する． |
| １１） |
CO-Hb 飽和度の算出：次の計算式によって算出する．
CO-Hb (％) = 100 x V/ (Hb x 4 x 22.4 x 1,000/64,458）
V：試料中のCO量（ml/100g，標準状態）
Hb：試料中の総Hb量（g/100g）
64,458：ヘモグロビンの分子量
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| １２） |
総ヘモグロビンの測定は，和光純薬製の総ヘモグロビン測定用キット (シアンメトヘモグロビン法）を用いる． |
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| 図1 ＣＯの解離に使用する装置 |
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| （図Ａ） |
（図Ｂ） |
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| ii）GCの条件 |
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| 装置： |
ガスクロマトグラフ |
| 検出器： |
TCD（熱伝導度検出器） |
| カラム1)： |
Molecular Sieve 5A （60-80 mesh），2.1 m ×3 mm i.d. |
| 温度： |
カラム 100℃；注入部 110℃；検出器 100℃ |
| キャリアガス： |
ヘリウム 0.6 kg/cm2，（約 24 ml/min） |
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| 【注 解】 |
| １） |
使用前に 250℃で12時間以上エージングしておく． |
| ２） |
酸素，窒素，メタン（内部標準物質）およびCOの保持時間はそれぞれ1.1分，1.6分，2.5分および4.2分である． |
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| 【文 献】 |
| １． |
小島 亨 他．日法医誌 1981；35：305-311 |
