| i）操作法 |
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| 試料（血液） 20-30 μl2) |
| ↓ |
0.1% Na2CO3液3) 8 mlを加え，希釈する4)． |
| 血液希釈液（5 ml） |
| ↓ |
i) ハイドロサルファイトナトリウム（Na2S2O3）約10 mgを加えて溶かす5)．
ii) 1N NaOH溶液 0.5 mlを加え6)，ゆっくり混和する． |
| 混合液 |
| ↓ |
直ちに分光光度計セルに入れ，500 nmから600 nmの吸収スペクトルを測定する． |
| 530 nm付近および560 nm付近の最大吸光度を求める． |
| ↓ |
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| CO-Hb飽和度7)の計算 |
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計算式：COHb（%） = （A530 × 2 - A560）/A530 ×100
A530：530 nm付近の最大吸光度 ； A560：560 nm付近の最大吸光度 |
| 【注 解】 |
| １） |
分光光度法には種々の測定法が報告されているが，ここでは換算式から求める方法を用いた．この方法は100% 飽和 CO-Hb 血液や検量線作成が不要で，多少精度は劣るが簡便であり，焼死判定のルーチンには適している．ただし，10%
以下は不正確である． |
| ２） |
体液が入っているような胸腔液，腹腔液や腐敗した血液などは，一般に分光光度法は不適当である．凝固血液では，その 2 g に対して生理食塩水 8
ml を加え，テフロンホモジナイザーで緩やかにホモジナイズしたものを分析に供する．ただし，流動血に比べるとその値の信頼性は劣る． |
| ３） |
使用前に溶液を脱気しておくと良い． |
| ４） |
530 nm の吸光度が 0.3～0.4 になるようにする． |
| ５） |
青みを帯びた色に変色する．試薬が古くなると還元力が落ちるので，刺激臭の強い古い試薬は使用しないこと． |
| ６） |
赤みを帯びた色に戻る． |
| ７） |
大都市における非喫煙者の正常血中 CO-Hb濃度は１％以下であるが，１日15本以上の喫煙者では３-５％に増大する． |
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| 【文 献】 |
| １． |
福井巳芳 他．裁判化学．東京：広川書店，1971 |
