| i）前処理 |
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| 試料（尿） 5 ml |
| ↓ |
10N 水酸化カリウム0.5 mlを加え，50 ℃で15分加温する． |
| 加水分解液 |
| ↓ |
i) 冷却後，酢酸を添加してpH 4付近に調整する．
ii) 加水分解液を50 mlの分液ロート1)に入れる．
iii) 内部標準物質プラゼパム 25 μl（10 µg/mlメタノール溶液）を加え，水 5 ml及びヘキサン/酢酸エチル（４：１, v/v）15
mlを加え振盪する．
iv) 上層の有機層を取り，共栓試験管に入れる．
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| ヘキサン-酢酸エチル層 |
| ↓ |
窒素気流下，溶媒を留去する． |
| 残渣 |
| ↓ |
i) 残渣にBSTFA（1% TMCSを含む）2)50 µlを加え，90 ℃で20分間加温する．
ii) 2 µlをGC/MSに注入する． |
| GC/MS |
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| ii）GC/MSの条件 |
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装置：
カラム：
温度：
キャリアガス：
確認スペクトル
注入法：
イオン化：
測定： |
ガスクロマトグラフ/質量分析計
DB-1, 30 m×0.25 mm i.d., 膜厚0.25 µm
カラム 60 ℃（0.5 min）-20 ℃/min-280 ℃；注入口 200 ℃
ヘリウム (6.5 psi)
THCA-TMS m/z 371, 473, 488
スプリットレス (1 min)
EI 70 eV
質量範囲m/z 50－550 ；時間25 min
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| 【注 解】 |
| １） |
50 mlのネジ口試験管でも代用できる． |
| ２） |
1 % Trimethylchlorsilane（TMCS）を含むN,O-Bis（trimethylsilyl）trifluoroacetamide（BSTFA, ピアス，USA）． |
| ３） |
尿を用いて大麻の摂取を証明するには，尿中の11-nor-△9-Tetrahydrocannabinol-9-carboxyric acid (THCA)を検出する． |
| ４） |
THCAの判定基準は次の通りとする．
| １． |
尿中THCA濃度がカットオフ値（20 ng/ml）以上． |
| ２． |
標準THCA-TMSと保持時間(13 min)が一致． |
| ３． |
標準THCA-TMSのマススペクトルとの一致． |
| ４． |
ブランク尿がカットオフ値の1/10以下であることを確認． |
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| ５） |
THCAの標準品は日本シンテックスから購入可能． |
| ６） |
試料中THCAの安定性はpHと温度の影響が大きいため，弱アルカリ性とし4 ℃以下で保存する． |
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| 【文 献】 |
| １． |
生体試料の薬物鑑定に関する総合的研究班編（厚生省）．生体試料の薬物鑑定フォーラム’94．1994; p.77-106. |
