i)前処理法(固相抽出) |
|
試料(尿) 5 ml |
↓ |
i) pH 6に調整し,内部標準物質ケタミン50 µl (1 µg/mlメタノール溶液)を加える.
ii) アプライする. |
Bond Elut Certify カートリッジカラム1) (300 mg, Varian) |
↓ |
i) 水3 ml,1 M酢酸3 ml,水3 mlで順次カラムを洗浄後,5分間吸引して乾燥する.
ii) メタノール3 mlでカラムを洗浄後,カラムを5分間以上吸引して十分に 乾燥する.
iii) メタノール/アンモニア水(98:2, v/v)2 mlで溶出する. |
溶出液 |
↓ |
窒素気流下,溶媒を留去する. |
残渣 |
↓ |
酢酸エチル/BSA2)(2:1, v/v)50 µlを加え,1 µlをGC/MSに注入する. |
GC/MS |
|
|
【注 解】 |
1) |
予め,メタノール3 ml,水3 mlを順次流してカラムを活性化する. |
2) |
N,O-bis (trimethylsilyl) acetamide(和光純薬工業) |
|
|
ii)GC/MSの条件 |
|
|
装置:
カラム:
温度:
キャリアガス:
確認スペクトル
注入法:
イオン化:
測定: |
ガスクロマトグラフ/質量分析計
DB-1, 30 m×0.25 mm i.d., 膜厚0.25 µm
カラム 60 ℃(0.5 min)-20 ℃/min-280 ℃;注入口 200 ℃
ヘリウム (6.5 psi)
PCP m/z 200, 242, 186, 166
スプリットレス (1 min)
EI 70 eV
質量範囲m/z 50-550 ;時間25 min
|
|
|
|
|
【注 解】 |
1) |
PCPの判定基準は次の通りとする.
1. |
尿中PCP濃度がカットオフ値(25 ng/ml)以上. |
2. |
標準PCPと保持時間が一致. |
3. |
標準PCPのマススペクトルとの一致. |
4. |
ブランク尿がカットオフ値の1/10以下であることを確認. |
|
2) |
主代謝物として,水酸化体4-phenyl-4-piperidino-cyclohexanol (PPC), 1-(1-phenyl- cyclohexyl)-4-hydroxypiperidine
(PCHP)が生成する.必要があればTMS体として確認する. |
|
PPC-TMS m/z 200, 331, 186 |
|
PCHP-TMS m/z 288, 331, 260 |
|
|
【文 献】 |
1. |
生体試料の薬物鑑定に関する総合的研究班編(厚生省).生体試料の薬物鑑定フォーラム’94.1994; p.77-106. |