i)前処理法(液-液抽出) |
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試料(血液,尿) 0.5 ml |
↓ |
i) 内部標準物質p-トルイル酸 50 µl (100 µg/ml水溶液)1) と0.1 M塩酸 0.25 mlおよび酢酸エチル2 mlを加えて振盪する.
ii) 3,000 rpmで10分間遠心する.
iii) 上層の有機層を取り、共栓試験管に入れる. |
酢酸エチル層 |
↓ |
窒素気流下,溶媒を留去する. |
残渣 |
↓ |
i) ピリジン/BSTFA(1 % TMCS含)(1:1, v/v)2)100 µlを加え,90 ℃,30分間加温する.
ii) 1 µlをGC/MSに注入する. |
GC/MS |
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ii)GC/MSの条件 |
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装置:
カラム:
温度:
キャリアガス:
確認スペクトル
注入法:
イオン化:
測定: |
ガスクロマトグラフ/質量分析計
DB-1, 20 m×0.25 mm i.d., 膜厚0.25 µm
カラム 60 ℃(0.5 min)-20 ℃/min-280 ℃;注入口 200 ℃
ヘリウム (6.5 psi)
GHB-TMS m/z 159, 233, 248, 277
スプリットレス (1 min)
EI 70 eV
質量範囲m/z 50-550 ;時間25 min
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【注 解】 |
1) |
内部標準物質はα-メチレンガンマブチロラクトンでもよい. |
2) |
1 % Trimethylchlorsilane(TMCS)を含むN,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide(BSTFA,
ピアス,USA)を同容量の無水ピリジンと混和して調製する. |
3) |
GHBの判定基準は次の通りとする.
1. |
標準GHB-TMSと保持時間が一致. |
2. |
標準GHB-TMSのマススペクトルとの一致. |
3. |
ブランク尿がカットオフ値以下であることを確認. |
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4) |
尿中GHBのカットオフ値:尿はGHB10 μg/ml(生体,死体).血液5 μg/ml(生体),50 μg/ml(死体).内因性のものもあるため非常に難しい.腐敗の激しいときは要注意. |
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【文 献】 |
1. |
Mazarr-Proof S, S Kerrigan S. J Anal Toxicol 2005; 29: 398-400. |
2. |
Moriya F, Hashimoto Y. Forensic Sci Int 2005; 148: 139-42. |